美國nightsea熒光濾光片的選擇指南

作者：美國nightsea 時間：2026-03-30 05:47:26瀏覽2831 次

信息摘要：

葉綠素發出遠紅色的光，其峰值在約685 nm處。在使用Longpass濾光片製作的左側圖像中，紅色熒光難以區分綠色GFP熒光。綠色的bandpass濾光片消除了這種情況，使您很容易看到葉子中的GFP熒光。

美國nightsea 熒光濾光片的選擇指南

由於GFP（綠色熒光蛋白）和其他綠色發光體（例如FITC）是使用廣泛的熒光染料，因此我們的寶藍色激發/發射裝置是體視鏡熒光適配器常用的選擇。在黃色Longpass和綠色bandpass熒光濾光片選項之間進行選擇時，經常會要求我們提供建議。本文將介紹每種方法的優缺點。

熒光濾光片光譜特性
Longpass –傳輸大於500nm的波長
bandpass –僅在500 – 560nm之間傳輸

長波和帶通熒光濾光片，用於寶藍色激發，實際上，這意味著bandpass僅傳輸綠色波長，而Longpass則傳輸綠色，黃色，橙色和紅色。

長波和帶通濾光片

熒光濾光片的作用

熒光應用中任何濾光片的目的都是為了增加您想要看到的東西（“信號”）的觀看對比度。主要工作是阻擋來自激發源的反射光並透射熒光發射。其他潛在的幹擾源（“噪聲”）是觀看區域中其他物質的熒光，這些物質可以掩蓋目的信號。這可能是來自諸如生長培養基（與秀麗隱杆線蟲一起使用時）或對象本身的一部分（例如植物中的葉綠素或發育中的斑馬魚卵黃）之類的背景熒光。

Longpass濾光片和bandpass濾光片都可以很好地阻擋激發光。

盡管您可能會認為選擇與預期釋放量緊密匹配的濾光片會更好，但這並非總是如此。

用長通熒光濾光片成像的擬南芥熒光

如果您要消除的噪聲與信號沒有重疊，則bandpass是(shi)一(yi)個(ge)不(bu)錯(cuo)的(de)選(xuan)擇(ze)。例(li)如(ru)，在(zai)擬(ni)南(nan)芥(jie)或(huo)其(qi)他(ta)植(zhi)物(wu)中(zhong)，葉(ye)綠(lv)素(su)發(fa)出(chu)的(de)紅(hong)色(se)熒(ying)光(guang)就(jiu)是(shi)這(zhe)種(zhong)情(qing)況(kuang)，如(ru)上(shang)圖(tu)所(suo)示(shi)。葉(ye)綠(lv)素(su)發(fa)出(chu)遠(yuan)紅(hong)色(se)的(de)光(guang)，其(qi)峰(feng)值(zhi)在(zai)約(yue)685 nm處。在使用Longpass濾光片製作的上側圖像中，紅色熒光難以區分綠色GFP熒光。綠色的bandpass濾光片消除了這種情況，使您很容易看到葉子中的GFP熒光（下圖），如果您要了解GFP熒光的激發光源，推薦到GFP激發光源專業網站進行選購：GFP激發光源。

帶通濾光片對擬南芥熒光成像

帶通熒光濾光片對擬南芥熒光成像

如果噪聲與信號頻譜重疊，則bandpass濾波器可能會引起混淆。使用Longpass濾波器，您可以通過兩種潛在的方式將信號與噪聲區分開：強度和顏色。使用bandpass濾鏡，您可以刪除顏色（光譜），而僅保留強度。下麵的熒光轉基因斑馬魚圖像說明了這一點。這條魚**在心髒中表達GFP，在血細胞中表達mCherry。下圖是兩幅圖像的合成-一幅是使用Longpass濾波器拍攝的，另一幅是使用綠色bandpass濾波器拍攝的。

通過Longpass（頂部）和bandpass濾光片拍攝的轉基因熒光斑馬魚

通過長通（頂部）和帶通濾光片拍攝的轉基因熒光斑馬魚
通過Longpass（頂部）和bandpass濾光片拍攝的轉基因熒光斑馬魚

在(zai)上(shang)麵(mian)的(de)圖(tu)像(xiang)中(zhong)，您(nin)可(ke)以(yi)看(kan)到(dao)綠(lv)色(se)熒(ying)光(guang)的(de)心(xin)髒(zang)，紅(hong)色(se)熒(ying)光(guang)的(de)血(xue)細(xi)胞(bao)和(he)蛋(dan)黃(huang)的(de)天(tian)然(ran)黃(huang)色(se)熒(ying)光(guang)。這(zhe)些(xie)很(hen)容(rong)易(yi)區(qu)分(fen)。在(zai)下(xia)部(bu)圖(tu)像(xiang)中(zhong)，內(nei)容(rong)均(jun)以(yi)不(bu)同(tong)的(de)綠(lv)色(se)強(qiang)度(du)顯(xian)示(shi)。心(xin)髒(zang)明(ming)亮(liang)，但(dan)蛋(dan)黃(huang)沒(mei)有(you)那(na)麼(me)暗(an)。說(shuo)綠(lv)色(se)都(dou)與(yu)GFP表達有關是不正確的。在這種情況下，建議使用Longpass濾鏡觀看物體。

在某些情況下，選擇不太明顯。秀麗隱杆線蟲的生長培養基具有一些背景綠色熒光。與黃色長通相比，綠色bandpasslvjingqueshizengjialeyixieqingxiduheduibidu。zaixuduoceshizhong，womenrangshumingguanchayuanguanchalexiangtongdeyangben。youxierenxihuanchangtong，yinweitamenrenweizheshijishangyouzhuyuzhakanbeijingdemouxiebeijing，erlingyixierenzexihuantongyiyangpindedaitong。zaizhezhongqingkuangxia，henkenenghaiyouqitaxuanze，xuanzebingbuwanquanmingxian，kenengqujueyugerenxihao。

如果您正在自然探索熒光？長傳肯定是要走的路。您無法使用帶通濾鏡捕獲此草花的圖像。

顯微鏡下的香薊