GFP手電筒用於哺乳動物轉基因研究的熒光標記
為了確定熒光蛋白在眼睛中的可見性,我們使用了手持便攜式雙熒光手電筒下檢查了轉基因小鼠。32 行中有 27 行(84%)在便攜式GFP手電筒下激發後顯示出可見熒光(圖 2A)。這些眼睛標記在便攜式長波紫外線燈LUYOR-3280UV下也可見,如前所述,使用無處不在的熒光標記。不同線條之間的熒光強度不同,隻有在暗室中激發後才能看到zui暗的線條,即使沒有激發,在室內光線下也能看到zui亮的線條(圖 2B)。我們還在黑色和刺鼠背景上劃了一些線,以分析色素如何影響熒光眼標記的可視化。色素的存在降低了熒光強度(圖 2B)。盡管如此,即使房間燈打開,在刺鼠和黑色背景中仍然很容易看到高和中 EGFP 和 tdTomato 線xian。然ran而er,低di表biao達da的de報bao告gao線xian在zai有you色se小xiao鼠shu中zhong是shi微wei弱ruo的de,盡jin管guan它ta們men在zai黑hei暗an的de房fang間jian中zhong仍reng然ran可ke以yi檢jian測ce到dao。因yin此ci,這zhe些xie記ji者zhe可ke用yong於yu色se素su和he非fei色se素su小xiao鼠shu。重zhong要yao的de是shi,我wo們men已yi經jing將jiang這zhe些xie品pin係xi維wei持chi了le許xu多duo代dai(某些品係中 > 25 代),並且我們沒有觀察到熒光標記隨著時間的推移而失活。因此,可以從一代到下一代始終如一地跟蹤眼睛標記熒光。

GFP手電筒和RFP手電筒照射效果對比:
鏡頭中表達的各種熒光蛋白可以在手持轉基因熒光手電筒照射下可直接觀察。使用GFP手電筒可以看到五個熒光眼標記,而使用RFP手電筒隻能看到 mOrange、tdTomato 和 mPlum。(B) EGFP 和 tdTomato 標記表達在轉基因係 (低、中、高) 之間變化。插圖顯示 EGFP “高”線在無激發的室內光下可見。EGFP“中”和 tdTomato“高”轉基因係也顯示在有色(Agouti,黑色)背景中。請注意,熒光眼標記的可見性在有色背景中會降低。
GFP手電筒:
GFP手電筒又叫熒光蛋白觀察手電筒,英文名:GFP flashlight,GFP torch,GFP手(shou)電(dian)筒(tong)是(shi)通(tong)過(guo)發(fa)出(chu)藍(lan)光(guang)或(huo)紫(zi)外(wai)光(guang)激(ji)發(fa)動(dong)植(zhi)物(wu)體(ti)內(nei)發(fa)熒(ying)光(guang)蛋(dan)白(bai)發(fa)光(guang),通(tong)過(guo)專(zhuan)用(yong)的(de)熒(ying)光(guang)蛋(dan)白(bai)觀(guan)察(cha)眼(yan)鏡(jing),操(cao)作(zuo)者(zhe)就(jiu)能(neng)夠(gou)直(zhi)接(jie)觀(guan)察(cha)到(dao)綠(lv)色(se)熒(ying)光(guang)蛋(dan)白(bai)的(de)表(biao)達(da)效(xiao)果(guo),是(shi)近(jin)幾(ji)年(nian)才(cai)上(shang)市(shi)的(de)一(yi)款(kuan)便(bian)攜(xie)式(shi)激發光源,是做轉基因研究不需要熒光顯微鏡就能觀察熒光的方便快捷的工具。
上圖:LUYOR-3280 GFP手電筒
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